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簡要描述:Calypso生物大分子相互作用分析儀,定量的表征生物大分子間的相互作用,如抗原/抗體、酶/抑制劑、蛋白質(zhì)/多糖等重要生物學(xué)體系,是生命科學(xué)研究及生物技術(shù)研究的關(guān)鍵。
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品牌 | WYATT/美國懷雅特 | 價格區(qū)間 | 面議 |
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產(chǎn)地類別 | 進(jìn)口 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生 |
Calypso生物大分子相互作用分析儀是一個以組分-梯度多角度光散射(CG-MALLS)為基礎(chǔ)的生物大分子間相互作用分析系統(tǒng),可以快速、自動、無損、定量的表征大分子間的相互作用,具有重復(fù)性高、靈敏度高及無需樣品修飾等諸多優(yōu)點。該系統(tǒng)可以分析分子間的特異性及非特異性相互作用,聚集或解離的動力學(xué)等。對于分子間的特異性相互作用,Calypso可以測定其自聚作用及不同樣品分子間的異聚作用,得到平衡解離常數(shù)Kd及反應(yīng)的化學(xué)計量數(shù)。對于非特異性相互作用,可以測定其維力系數(shù),并判斷分子間的作用力及強度。此外,Calypso還可以測定反應(yīng)的動力學(xué),樣品的重均分子量及均方根半徑等重要分子信息。
Calypso分析系統(tǒng)無需對樣品進(jìn)行修飾(熒光標(biāo)記、固定化等),且在溶液環(huán)境中測量,因此可以大程度的保證樣品的天然狀態(tài),從而得到其他技術(shù)難以得到的結(jié)果,真實的表征生物大分子間的相互作用,樣品方便回收。
Calypso分析系統(tǒng)的工作原理:組分-梯度多角度光散射(CG-MALS)是新的分析技術(shù)之一,利用分子量的變化測定分子間的相互作用。溶液中大分子的散射光強依賴于物質(zhì)的濃度C和重均分子量Mw,分子間發(fā)生復(fù)合,Mw則增加。例如,若所有的蛋白質(zhì)分子以二聚體形式出現(xiàn),則散射光強也會增倍。對于可逆的聚集,蛋白與單體蛋白復(fù)合的比例會達(dá)到一個平衡值,這個值依賴于每種蛋白初始的濃度和緩沖液的條件。不同的組成和濃度會導(dǎo)致Mw不同。通過分析一系列不同組成和濃度的光散射結(jié)果,可以確定所發(fā)生的聚集形式、各自的結(jié)合親和力Ka、結(jié)合和解離平衡常數(shù)。手動配制比例及測量是一項繁瑣、費時間且容易產(chǎn)生操作誤差的工作,Calypso系統(tǒng)通過自動化的過程克服了CG-MALS手動操作的困難,將樣品配制、輸送及數(shù)據(jù)的采集和分析集合于一體,完美的保證了實驗的重復(fù)性,并解決了人工配制樣品時引入操作誤差的問題。
技術(shù)優(yōu)勢
1. 智能化配樣,消除了手動配樣時的誤差問題;
2. 樣品直接測試,無需標(biāo)記化或固定化,大程度的保證了樣品的天然狀態(tài);
3. 快速的測定時間,半小時即可測得實驗結(jié)果;
4. 適用于各類生物反應(yīng)體系的測定;
5. 體系中自聚及不同樣品分子異聚的分析;
6. 化學(xué)計量點,平衡常數(shù)的分析,平衡常數(shù)范圍:pM – mM;
7. 反應(yīng)動力學(xué)的分析;
8. 與激光檢測器、濃度檢測器聯(lián)用,快速測定物質(zhì)的Mw、Rg、A2、A3;獲取Zimm圖;
Calypso生物大分子相互作用分析儀應(yīng)用領(lǐng)域:
1. 酶反應(yīng)體系:酶與抑制劑的相互作用,酶促動力學(xué)等
2. 藥物探索:藥物對蛋白質(zhì)間相互作用的影響等
3. 免疫研究:抗原/抗體的相互作用等
4. 方法改進(jìn):測定及調(diào)整第二維力系數(shù),幫助純化抗體,確定多聚體的組成,確定樣品的優(yōu)溶解條件等。
5. 結(jié)合特異性:化學(xué)計量點,平衡常數(shù),離子強度、pH或者輔料對多聚物或者蛋白結(jié)合的影響等。
6. 多分子復(fù)合物的結(jié)構(gòu)分析:在一系列緩沖溶液、時間、溫度變化下,表征大分子聚集過程中分子間的結(jié)合強度,以及確定其化學(xué)計量關(guān)系,通過Mw及Rg判斷其空間構(gòu)型。
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