示差折光檢測器又稱折射率檢測器,是一種通用型檢測器,它是通過連續(xù)監(jiān)測參比池和測量池中溶液的折射率之差來測定試樣濃度的檢測器。常見示差折光檢測器按結(jié)構(gòu)可分為反射式、偏轉(zhuǎn)式、干涉式和克里斯塔效應(yīng)等類型。偏轉(zhuǎn)式折光檢測器池體積大,測量范圍寬,一般只在制備色譜和凝膠滲透色譜中使用。通常的HPLC都使用反射式折光檢測器,因其池體積很小(小于5μL),可獲得較高靈敏度。
示差折光檢測器主要受溫度、流速以及流動相的種類等因素的影響,示差折光檢測器是較難穩(wěn)定,但是和儀器本身的硬件條件有問題,如能設(shè)法控制以下幾個因素,情況會大有改善:
(1)流動相一定要混勻,而且要充分脫氣,最好用單元泵。
(2)有條件的話將溶劑瓶、柱溫箱、檢測器的光學(xué)單元溫度控制在同一個溫度,且最好高于室溫5~10℃。不要將檢測器放置在通風(fēng)櫥或是空調(diào)出風(fēng)口處。
(3)環(huán)境溫度不要變化太大,實驗室最好門窗關(guān)閉,如果沒有柱溫箱那就把檢測器溫度調(diào)低一點。
(4)要把廢液瓶和溶劑瓶放在示差檢測器與泵以上位置,這樣可以使樣品池略有壓力,有助于優(yōu)化檢測器性能。
示差折光檢測器的普及程度僅次于紫外檢測器。此檢測器對溫度的變化敏感,使用時溫度變化要求保持在±0.001℃范圍內(nèi)。此檢測器對流動相流量變化也敏感,要求流動相組成*恒定,稍有變化都會對測定產(chǎn)生明顯的影響,因此一般不宜作梯度洗脫。此外,示差折光檢測器靈敏度較低,不宜用作痕量分析。