凝膠滲透色譜(GelPermeationChromatography、GPC)是1964年,由J.C.Moore首先研究成功。不僅可用于小分子物質(zhì)的分離和鑒定,而且可以用來分析化學(xué)性質(zhì)相同分子體積不同的高分子同系物。(聚合物在分離柱上按分子流體力學(xué)體積大小被分離開)。
凝膠色譜不但可以用于分離測定高聚物的相對分子質(zhì)量和相對分子質(zhì)量分布,同時根據(jù)所用凝膠填料不同,可分離脂溶性和水溶性物質(zhì),分離相對分子質(zhì)量的范圍從幾百萬到100以下。近年來,凝膠色譜也廣泛用于小分子化合物。相對分子質(zhì)量相近而化學(xué)結(jié)構(gòu)不同的物質(zhì),不可能通過凝膠滲透色譜法達到*分離純化的目的。凝膠色譜不能分辨分子大小相近的化合物,相對分子質(zhì)量相差需在10%以上才能得到分離。
凝膠滲透色譜是一個復(fù)雜的體系,需要考慮的問題很多。在這里我就色譜柱使用分享給大家一些經(jīng)驗:
色譜柱的安裝和使用:
在連接色譜柱之前,預(yù)先用即將使用的流動相體系置換以前用的流動相體系。
在連接色譜柱時,要趕走因色譜柱保存不當(dāng)或長時間不用在色譜柱的進口或者出口處產(chǎn)生的一些氣泡。
連接色譜柱要注意標(biāo)示的色譜柱進出口方向。
如果分析所用的溫度較高,應(yīng)在較低的流速下比如0.2到0.3ml/min的流速下緩慢地升高溫度,當(dāng)溫度達到設(shè)定溫度后,再慢慢地增大流速至設(shè)定值。
如果色譜柱需要較長的時間才能平衡穩(wěn)定,檢查色譜柱連接處是否有漏液。